Ποιος θέλει να ζήσει ακόμα Μια Νύχτα στο Μουσείο; Ο Μπεν Στίλερ σίγουρα θέλει και θα την ζήσει ξανά υπό τις σκηνοθετικές οδηγίες του Σον Λέβι! Υπόθεση… Η νύχτα έχει πέσει στο Ίδρυμα Σμιθσόνιαν της Ουάσιγκτον. Οι φύλακες έχουν φύγει, τα φώτα έχουν σβήσει, τα παιδιά είναι ήδη στα κρεβάτια τους και κοιμούνται… κι όμως κάτι απίστευτο συμβαίνει, καθώς ο πρώην νυχτοφύλακας Λάρι Ντέιλι (Μπεν Στίλερ) βρίσκεται μπλεγμένος στη μεγαλύτερη και πιο φανταστική περιπέτεια της ζωής του. Ο Λάρι έρχεται αντιμέτωπος με μια επική μάχη που λαμβάνει χώρα… στους διαδρόμους του μεγαλύτερου μουσείου στον κόσμο. Και πρέπει να προσπαθήσει να σώσει τους πρώην \»άψυχους\» φίλους του από τους κινδύνους που ελλοχεύουν…
 
Για τους παραγωγούς της ταινίας, αν θα υπήρχε μια κινηματογραφική συνέχεια και ο Λάρι (Μπεν Στίλερ) επρόκειτο να ζούσε ένα ακόμη συναρπαστικό ταξίδι, γνώριζαν ότι θα έπρεπε να πάνε ένα βήμα παρακάτω… Τι πιο γιγάντιο θα μπορούσε να βρεθεί από το Μουσείο Φυσικής Ιστορίας της Νέας Υόρκης; Όπως εξηγεί ο σκηνοθέτης Σον Λέβι, \»θέλαμε ό,τι κάναμε στην πρώτη ταινία να είναι όχι μόνο μεγαλύτερο, αλλά και καλύτερο στην δεύτερη. Θέλαμε το νέο ταξίδι του Λάρι να είναι ακόμη πιο μαγευτικό και να τον βοηθούσε να βρει τον καλύτερο εαυτό του, όπως και στην πρώτη ταινία. Είχα συμφωνήσει με τον Μπεν Στίλερ ότι δεν θα συνεχίζαμε την ιστορία αν δεν είχαμε μια ωραία συνέχεια να αφηγηθούμε- όταν λοιπόν τέθηκε η ιδέα να μεταφερθεί η δράση στο Σμιθσόνιαν, όλα πήραν τον δρόμο τους\».